芜菁类黄酮3’-羟化酶基因的功能鉴定及启动子初步分析

编号 zgly0001497054

文献类型 期刊论文

文献题名 芜菁类黄酮3’-羟化酶基因的功能鉴定及启动子初步分析

作者 许志茹  马静  崔国新  刘通  刘关君 

作者单位 东北林业大学生命科学学院  东北林业大学林学院  东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室 

母体文献 植物研究 

年卷期 2015年04期

年份 2015 

分类号 Q943.2 

关键词 芜菁  类黄酮3’-羟化酶基因  遗传转化  启动子  功能分析 

文摘内容 类黄酮3’-羟化酶(Flavonoid 3’-hydroxylase,F3’H)是细胞色素P450单加氧酶,在花青素合成途径中催化二氢山奈酚生成二氢槲皮素,进而形成矢车菊色素。利用津田芜菁Br F3’H1和赤丸芜菁Br F3’H2基因构建过量表达载体后遗传转化烟草,转基因植株的花色加深。通过染色体步移法克隆了Br F3’H1和Br F3’H2基因上游846和851 bp的启动子序列。生物信息学分析表明,Br F3’H1P和Br F3’H2P均包含TATA box、CAAT box、光调控元件、MRE、ABRE、ATGCAAAT-motif、ERE、O2-site、RY-element、LTR等多个顺式作用元件;二者的核苷酸序列在7个位点存在差异。利用Br F3’H1P和Br F3’H2P序列替换p CAMBIA1301植物表达载体的35S启动子后遗传转化烟草。GUS组织化学染色结果表明,Br F3’H1P和Br F3’H2P序列均能驱动GUS基因表达。通过PCR方法获得了Br F3’H1P和Br F3’H2P的一系列缺失片段,融合GUS基因后转化烟草。染色结果显示,Br F3’H1P和Br F3’H2P系列缺失片段均具有起始GUS基因表达的活性。Br F3’H1和Br F3’H2基因的功能鉴定及启动子的初步分析将为揭示津田芜菁和赤丸芜菁F3’H基因的光诱导表达调控机理奠定研究基础。