苜蓿夜蛾hsp90基因cDNA序列的克隆与表达研究

编号 zgly0001493900

文献类型 期刊论文

文献题名 苜蓿夜蛾hsp90基因cDNA序列的克隆与表达研究

作者 张欢  刘洪娟  高艳玲  董天宇  赵奎军  樊东 

作者单位 东北农业大学农学院 

母体文献 植物保护 

年卷期 2015年02期

年份 2015 

分类号 Q785 

关键词 苜蓿夜蛾  热休克蛋白90  克隆  表达 

文摘内容 热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)是生物体适应外界不良环境条件的关键蛋白。热休克蛋白90(HSP90)是HSP家族的重要成员。本试验以苜蓿夜蛾为材料提取虫体总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到hsp90基因全长cDNA序列,命名为Hvhsp90(GenBank登录号KF636495)。该序列含有2 472个碱基,包括一个2 154个碱基的开放阅读框,编码一个含717个氨基酸的蛋白,分子量约为82.5ku,等电点为4.97,且含有5个标签序列及胞质特征序列MEEVD,推导的氨基酸序列与鳞翅目其他昆虫HSP90相似性85%~99%之间。RTPCR结果表明,该基因在苜蓿夜蛾不同发育时期和不同组织均有mRNA水平的特异性表达。该基因在大肠杆菌表达系统中进行了诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,HvHSP90能够高效表达,并与预测的融合蛋白分子量相符。