葡萄炭疽病可视化LAMP检测体系的建立及应用

编号 zgly0001523565

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄炭疽病可视化LAMP检测体系的建立及应用

作者 王贤达  郑巧美  陈婷  刘鑫铭  蔡盛华  范国成  雷龑 

作者单位 福建省农业科学院果树研究所  福建农林大学园艺学院 

母体文献 果树学报 

年卷期 2016年03期

年份 2016 

分类号 S436.631.1 

关键词 葡萄炭疽病  钙黄绿素  环介导等温扩增(LAMP)  检测 

文摘内容 【目的】建立葡萄炭疽病LAMP检测方法。【方法】在葡萄炭疽病菌ITS序列片段设计LAMP特异性引物,优化反应条件,建立葡萄炭疽病LAMP检测体系,并利用荧光显色剂(0.05 mmol·L-1钙黄绿素和0.5 mmol·L-1氯化锰混合液)实现检测结果的可视化;同时对该体系进行特异性和灵敏度的验证,对采集自5个地区的田间样品进行实测。【结果】除染病的待检样品有特异性反应,观察到亮绿色荧光信号外,其他供试菌株均无特异性扩增反应;对葡萄发病组织总DNA的检测灵敏分别是定量PCR和常规PCR的1/10和100倍,检测限达到了5×10-4mg·L-1;对来自福建等5个地区的样品进行实测,结果表明待检样品中有81.5%感染葡萄炭疽病菌,该检测结果与定量PCR的检测结果完全一致。【结论】本研究建立了一种基于荧光显色的可视化LAMP检测体系,该体系可用于葡萄炭疽病的田间样品检测。