杨梅RAPD-PCR体系的正交优化研究

编号 zgly0000393819

文献类型 期刊论文

文献题名 杨梅RAPD-PCR体系的正交优化研究

作者 高燕会  朱玉球  黄华宏  张雷凡  童再康 

作者单位 浙江林学院林业与生物技术学院 

母体文献 生物技术 

年卷期 2006,16(3)

页码 55-58

年份 2006 

分类号 S667.6 

关键词 杨梅  RAPD  体系优化  正交设计 

文摘内容 以杨梅DNA为模板, 对影响杨梅RAPD-PCR扩增的重要参数进行了优化试验, 以期建立杨梅RAPD反应的最佳体系。通过采用正交试验设计的方法, 对杨梅RAPD-PCR条件进行了优化, 结果表明最佳的杨梅RAPD-PCR的反应体系(20μl)中含有1×buffer, 1.0U TaqDNA聚合酶, 3.0mmol/L MgCl2, 0.30mmol/L dNIPs, 1.5μmol/L引物和模板DNA 30-40ng。适宜的扩增条件为94℃预变性3min, 再进入38个PCR循环(94℃变性30s, 38℃退火30s, 72℃延伸90s), 72℃延伸7min, 4℃保存。