DREB基因双T-DNA植物表达载体的构建及验证

编号 zgly0000335462

文献类型 期刊论文

文献题名 DREB基因双T-DNA植物表达载体的构建及验证

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 韩兆雪  曹墨菊  朱祯  荣廷昭 

作者单位 四川农业大学玉米研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2004,2(1)

页码 7-12

年份 2004 

分类号 Q943.2 

关键词 DREB基因  双T-DNA  植物表达载体  无选择标记  中间载体 

文摘内容 W34基因经pGEM-T-EASY载体, 克隆到pBDREB载体EcoRI位点, 得到在Amp平板上生长的转化子pBW34-DREB质粒; 质粒pBW34-DREB、pSPROK、pBlueks分别经Pst I/KpnI、KpnI/EcoRI、PstI/EcoRI双酶切, 三片段连接构建成中间表达载体pBWD-Tnos; 再用SmaI/EcoRV双酶切pBWD-Tnos。将回收的DREB基因的完整的表达结构元插入到经SmaI酶切的质粒载体pCDMAR-Hyg中, 构建成双T-DNA植物表达载体pCDMAR-pWDT-Hyg, 大小为13.59kb, 经酶切鉴定, 证明构建的载体与预期设计的一致。将此双T载体用农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织, 期望得到无选择标记的安全的转基因植物。