At2基因双T-DNA植物表达载体的构建

编号 zgly0001435725

文献类型 期刊论文

文献题名 At2基因双T-DNA植物表达载体的构建

作者 王文玲  王贤磊  熊丽曼  高兴旺  李冠 

作者单位 新疆大学生命科学与技术学院 

母体文献 北方园艺 

年卷期 2012年12期

年份 2012 

分类号 Q943.2 

关键词 At2基因  双T-DNA  植物表达载体  无选择标记 

文摘内容 以甜瓜品种‘MR-1’为试材,采用PCR技术,扩增出了At2基因并在两端添加BamHⅠ和SacⅠ酶切位点。结果表明:在NCBI上进行BLAST显示其氨基酸序列与GeneBank中已公布的At2基因的同源性为99%;经DNAMAN软件分析,核苷酸序列同源性为99.43%。将其连接在中间表达载体G-pPTN133上,得到替换了GUS基因的中间载体A-pPTN133。A-pPTN133再经ScaⅠ酶切后,插入到经ScaⅠ酶切的pPTN133~-中,构建成双T-DNA植物表达载体At2-pPTN133。经酶切和PCR鉴定证明了所构建载体的正确性。