家蚕miRNA Novel-31~*上调溶血素基因的表达

编号 zgly0001528320

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕miRNA Novel-31~*上调溶血素基因的表达

作者 施莉莉  耿涛  吴萍  潘中华  覃光星  高坤  侯成香  郭锡杰 

作者单位 江苏科技大学生物技术学院  苏州大学基础医学与生物科学学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2016年07期

年份 2016 

分类号 Q78  S881.2 

关键词 家蚕  miRNA  Novel-31*  靶基因  慢病毒载体  溶血素 

文摘内容 【目的】Novel-31*是在家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,Bm CPV)感染的家蚕中发现的一个差异表达miRNA。本研究旨在验证Novel-31*对其靶基因表达的调控作用,以便进一步研究miRNA及其靶基因在昆虫免疫调节中的作用。【方法】用生物信息学方法预测Novel-31*的靶基因,荧光定量PCR分析Novel-31*及其靶基因在家蚕感染Bm CPV后不同时间点的表达变化;构建miRNA慢病毒表达载体和靶基因慢病毒表达载体,转染293T细胞,同时合成Novel-31*mimics转染家蚕培养细胞Bm N,使用荧光定量PCR检测Novel-31*对靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学方法预测发现,溶血素基因是Novel-31*的靶基因,其结合位点位于溶血素基因的5’UTR区域。荧光定量PCR分析表明,Novel-31*及溶血素基因在感染Bm CPV的家蚕血淋巴细胞中呈现明显的上调表达。荧光定量PCR检测表明,在Novel-31*慢病毒表达载体和溶血素基因5’UTR慢病毒表达载体转染的293T细胞中和在转染Novel-31*mimics的家蚕Bm N细胞中,溶血素基因都上调表达。【结论】溶血素基因是miRNA Novel-31*的靶基因,Novel-31*与溶血素基因5’UTR结合,上调溶血素基因的表达。