家蚕miR-301对化学感受蛋白基因csp9表达的调控

编号 zgly0001651987

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕miR-301对化学感受蛋白基因csp9表达的调控

作者 杨娟娟  王远卓  魏博帆  邢秋婷  阚云超  乔惠丽 

作者单位 南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室昆虫生物反应器河南省工程实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2018年10期

年份 2018 

分类号 Q963 

关键词 家蚕  miRNA  化学感受蛋白  靶基因  实时荧光定量PCR  双荧光素酶 

文摘内容 【目的】探索家蚕Bombyx mori miRNAs对化学感受蛋白基因表达的调控作用,以进一步研究miRNAs及其靶基因在昆虫化学识别中的作用。【方法】利用生物信息学方法预测和筛选可能作用于家蚕化学感受蛋白CSPs基因家族成员的miRNAs;实时荧光定量PCR分析预测获得的候选miR-301和其作用的靶基因在家蚕成虫不同组织中的表达变化;构建miR-301预测靶基因3′-UTR的双荧光素酶报告载体,与合成的miR-301 mimics或阴性对照转染人胚肾细胞HEK293,通过双荧光素酶报告基因检测系统中荧光素酶活性变化检测miR-301对其靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学分析结果发现,家蚕化学感受蛋白基因csp9是miR-301的预测靶基因,二者的结合位点位于csp9的3′-UTR区。实时荧光定量PCR检测结果表明,miR-301在交配后家蚕雌雄成虫触角和雄成虫头部都显著上调表达,靶基因csp9在对应组织中表达则显著下调。二者共转染HEK293细胞后,双荧光素酶检测结果表明,miR-301可以通过与csp9 3′-UTR的互作,显著抑制上游荧光素酶报告基因的表达。【结论】家蚕化学感受蛋白基因csp9是miR-301的靶基因,miR-301通过与靶基因3′-UTR的结合,在翻译水平上抑制csp9的表达。