喙尾琵甲DNA提取方法比较与AFLP反应体系的建立

编号 zgly0000641531

文献类型 期刊论文

文献题名 喙尾琵甲DNA提取方法比较与AFLP反应体系的建立

作者 赵敏  冯颖  和锐  陈晓鸣  冀焕红 

作者单位 中国林业科学研究院资源昆虫研究所 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2010(2)

页码 234-240

年份 2010 

分类号 Q963 

关键词 喙尾琵甲  基因组DNA  DNA提取  AFLP 

文摘内容 采用CTAB法、改进SDS-蛋白酶K法、SDS-饱和氯化钠法和提取试剂盒对喙尾琵甲的肌肉、虫卵和幼虫进行DNA提取，比较了DNA的提取和保存质量，并对AFLP试验的酶切时间、预扩增产物稀释倍数和选择性扩增引物量等关键因子进行试验和优化。结果表明：4种方法对肌肉组织提取的DNA质量都较好；3种传统方法提取的DNA的保存时间长于试剂盒提取的DNA；使用EcoRI／MseI内切酶组合，10UEcoRI和2UMseI分两步各酶切2h，T4连接酶3h连接后，以20倍稀释的预扩增产物和5ng／35ng的E＋3／M＋3引物量进行选择性扩增，建立了喙尾琵甲AFLP分子标记体系。