编号
zgly0000527829
文献类型
期刊论文
文献题名
果树基因组DNA的提取和PCR扩增测序方法
作者单位
山东省果树研究所
山东省农业科学院
母体文献
分子植物育种
年卷期
2007,5(F11)
页码
173-176
年份
2007
分类号
S66
Q781
关键词
苹果
基因组DNA
DNA提取
PCR产物
DNA测序
文摘内容
为避免多年生果树组织中的多糖和酚类物质影响基因组DNA的提取质量,在CTAB提取缓冲液中加入2%PVP-40和2%β-巯基乙醇,以改进的CTAB提取方法从苹果嫩叶中提取基因组DNA。所得DNA样品D_(260nm)/D_(280nm)比值为1.98~2.05,纯度高。当用DNA样品和设计的特异引物进行PCR扩增时,其PCR产物只出现一条清晰电泳谱带,质量满足测序要求,采用DNA纯化试剂盒纯化后可直接用于测序。该方法已成功用于"国光"和"金冠"苹果的基因组DNA测序,是一个操作简便、快捷和高效的方法,非常适用于果树基因组DNA的提取和测序。