柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析

编号 zgly0001423455

文献类型 期刊论文

文献题名 柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析

作者 孔春林  韩红玉  姜连连  王晔  董辉  赵其平  朱顺海  李婷  薛璞  舒凡帆  黄兵 

作者单位 上海师范大学生命与环境科学学院  中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点实验室 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 S852.7 

关键词 球虫  柔嫩艾美耳球虫  真核起始因子3d  毕赤酵母  真核表达 

文摘内容 在毕赤酵母真核表达系统中表达柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d(Emeria tenella eukaryotic initiation factor 3d,EteIF3d)基因,并获得具有天然构象的活性蛋白。将EteIF3d基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,将构建正确的重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞。在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导培养,收集1~3 d的表达上清。表达产物进行SDS-PAGE检测,并用Western blot进行免疫学分析。结果表明,本研究成功构建了重组质粒pPIC9k-EteIF3d,并成功表达该蛋白,且该蛋白能与兔抗EteIF3d血清特异性结合,具有良好的抗原性。EteIF3d基因可在真核表达系统毕赤酵母中表达,且获得蛋白具有抗原性,从而为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。