B型产气荚膜梭菌C58-1株ε毒素基因序列分析与可溶性表达

编号 zgly0001487656

文献类型 期刊论文

文献题名 B型产气荚膜梭菌C58-1株ε毒素基因序列分析与可溶性表达

作者 林初文  张松林  刘磊  马永彪  沈志强  韩文瑜 

作者单位 吉林大学动物医学学院  山东省滨州畜牧兽医研究院  山东绿都生物科技有限公司 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年05期

年份 2015 

分类号 S852.616.3 

关键词 产气荚膜梭菌B型C58-1株  ε毒素基因  表达  序列分析 

文摘内容 利用PCR技术从B型产气荚膜梭菌扩增出ε毒素基因,然后用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ对其进行酶切,回收984bp的ε毒素基因片段,将其定向克隆在载体PET-32a中,获得重组质粒pETε984。将pETε984转化至受体菌BL21(DE3)中。重组菌株经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PACE分析。结果表明,重组目的蛋白在大肠埃希菌成功表达,融合蛋白大小为51ku,存在于细菌培养上清中,可溶性蛋白占菌体总蛋白相对含量的67.8%。序列分析表明C58-1株ε毒素蛋白序列与目前公布的所有B型和D型产气荚膜梭菌同源性均在99.7%以上,但ε毒素蛋白序列第321位出现了S→Y突变。研究结果为ε毒素蛋白的亚单位疫苗研究奠定了基础。