红千层ISSR反应体系的优化

编号 zgly0000401781

文献类型 期刊论文

文献题名 红千层ISSR反应体系的优化

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 李伟  何桥  赵新成  梁国鲁 

作者单位 西南大学园艺园林学院 

母体文献 西南园艺 

年卷期 2006,34(3)

页码 1-4

年份 2006 

分类号 S685 

关键词 红千层  ISSR  正交设计  梯度PCR 

文摘内容 以红千层(Callistemon rigidusR.Br.)的幼叶为材料, 利用正交试验设计, 对ISSR反应体系中的主要影响因子进行优化筛选, 研究了Mg^2+、TaqDNA聚合酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度5种因素对扩增结果的影响, 同时研究了退火温度和循环次数对PCR扩增结果的影响。实验结果表明, 在25μL ISSR反应体系中各组分的最适浓度分别为: 1×PCRbuffer, 2.5mmol/LMg^2+,0.2mmol/L dNTPs, 0.4μmol/L引物, 1.2ng/μL模板DNA, 0.5U TaqDNA聚合酶。通过梯度PCR测验.适宜的退火温度为50℃, 循环次数45次。并且在红千层ISSR分析中, 带纹清晰, 稳定性好。