黑曲霉中生物合成赭曲霉毒素A的非核糖体肽合成酶基因的鉴定

编号 zgly0001706403

文献类型 期刊论文

文献题名 黑曲霉中生物合成赭曲霉毒素A的非核糖体肽合成酶基因的鉴定

作者 陈美榕  张梦薇  刘舒雯  朱柳杨  张健 

作者单位 工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2020年03期

年份 2020 

分类号 TS201.3  Q933 

关键词 黑曲霉  赭曲霉毒素A  非核糖体肽合成酶  基因敲除  实时定量PCR  高效液相色谱 

文摘内容 赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)是国际癌症研究机构认定的2B类致癌物。黑曲霉Aspergillus niger是美国食品药品监督局认可的食品安全菌。然而近年来陆续发现某些黑曲霉菌株能够产生OTA,这会对人类健康构成潜在威胁。阐明黑曲霉生物合成OTA的关键基因有助于理解OTA生物合成机制,这对OTA污染的防控具有重要意义。本研究克隆了产OTA黑曲霉中非核糖体肽合成酶(NRPS)编码基因(An15g07910),并对其进行了生物信息学分析,在此基础上采用同源重组的方法敲除了该基因,获得了一株性能稳定的敲除突变株Δnrps。与野生株相比,Δnrps突变株的表型在CYA培养基中并无明显改变,但在7d培养期间完全失去了合成赭曲霉毒素α(ochratoxinα,OTα)和OTA的能力,而赭曲霉毒素β(ochratoxinβ,OTβ)的合成不受影响。在野生株培养过程中,该nrps基因前4d表达量逐渐增大,并在第4天达到最高,随后基因表达量逐渐下降并趋于稳定,这与OTA的含量变化基本一致。结果表明该nrps基因(An15g07910)参与OTA的生物合成,其编码的NRPS可能负责催化苯丙氨酸部分和二氢异香豆素部分的交联。