骆驼天然单域重链抗体库的构建与鉴定

编号 zgly0001572138

文献类型 期刊论文

文献题名 骆驼天然单域重链抗体库的构建与鉴定

作者 周景明  翟圆君  耿玥  祁艳华  刘红亮  王爱萍 

作者单位 郑州大学生命科学学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2018年01期

年份 2018 

分类号 S852.4 

关键词 纳米抗体  噬菌体抗体库  莱克多巴胺  骆驼  噬菌体展示 

文摘内容 构建骆驼非免疫噬菌体抗体库,完成抗体库的鉴定。从未经免疫的健康骆驼的外周血淋巴细胞中提取总RNA后,特异性扩增骆驼重链抗体可变区(VHH)片段,将其与噬菌粒载体pCANTAB5E连接获得重组子,多次电转感受态大肠埃希菌TG1后获得VHH抗体基因库,并分析其库容量及多样性。结果表明,经过吸附-洗脱的淘选过程筛选出能够与莱克多巴胺人工抗原特异性结合的噬菌体展示纳米抗体。构建的骆驼天然重链单域抗体库的库容量为107,多样性良好,独立克隆所占比例为90%,筛选出针对莱克多巴胺人工抗原的噬菌体颗粒。已成功构建骆驼天然噬菌体重链抗体库,并筛选出抗莱克多巴胺的噬菌体颗粒,为抗莱克多巴胺纳米抗体的表达和莱克多巴胺的免疫学检测奠定基础,并为后续淘选针对特定抗原的单域重链抗体奠定了基础。