桔黄赛多孢菌胞外胰蛋白酶的酶学特性

编号 zgly0001715662

文献类型 期刊论文

文献题名 桔黄赛多孢菌胞外胰蛋白酶的酶学特性

作者 韩志萍  程慧莹  王飞 

作者单位 岭南师范学院化学化工学院  岭南师范学院清洁能源材料化学广东普通高校重点实验室  华中农业大学食品科学技术学院  中国热带农业科学院农产品加工研究所 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2020年08期

年份 2020 

分类号 Q936 

关键词 桔黄赛多孢菌  胰蛋白酶  分离纯化  底物特异性  动力学参数 

文摘内容 桔黄赛多孢菌Scedosporium aurantiacum是慢性肺病患者的常见呼吸道定植菌,在免疫缺陷人群中可引起侵袭性感染,致死率高,但由于致病机理不明,目前仍然缺乏有效的防控手段。我们在前期研究中,通过差异蛋白组学及酶工程技术发现分泌胰蛋白酶是桔黄赛多孢菌的潜在毒力因子,目前对这种蛋白酶的遗传信息、结构及致病机制并不清楚。本研究用Superdex S-200分子筛和DEAE-Sepharose离子交换两种填料将这种蛋白酶分离纯化出来,通过酶谱验证了纯化效果。进一步研究发现,这种胰蛋白酶对bFSR、bLSTR和bEKK 3种底物的水解性能最佳,对zFR和bzLR的水解性能最差。酶解最快的反应所对应的Km为6.09μmol/L,Vmax为13.01μmol/L/s,Kcat为23.65/s;酶解最慢的反应所对应的Km为29.94μmol/L,Vmax为11.35μmol/L/s,Kcat为20.63/s。研究结果对于填补赛多孢菌毒力因子研究的空白、针对毒力因子开发新型的抗真菌药物和治疗方法都具有重要意义。