瞬时表达靶向TMV外壳蛋白基因的siRNA能干扰病毒侵染

编号 zgly0001315989

文献类型 期刊论文

文献题名 瞬时表达靶向TMV外壳蛋白基因的siRNA能干扰病毒侵染

作者 赵明敏  安德荣  黄广华  何祖华  陈江野 

作者单位 西北农林科技大学植物保护学院  中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室  中国科学院上海生命科学院植物生理生态研究所植物分子遗传国家重点实验室  中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室 杨凌 712100  杨凌 712100  上海 200031  上海 200032 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2006年01期

年份 2006 

分类号 S432.41  Q78 

关键词 根癌农杆菌  烟草花叶病毒  外壳蛋白  siFNA  干扰 

文摘内容 RNA干扰(RNA interference,RNAi)是与内源性mRNA编码区某段序列同源的双链RNA导入细胞后,该mRNA发生特异性降解,从而导致该基因表达沉默的现象。小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)作为RNAi途径的重要中介, 已被广泛应用于动、植物抗病毒治疗研究。本文以烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)外壳蛋白基因为靶位,设计合成表达小干扰RNA的寡核苷酸,亚克隆到植物双元表达载体pBI121中,直接转化根癌农杆菌。通过根癌农杆菌介导的瞬时表达法,研究了同源于TMV外壳蛋白的siRNA对TMV侵染的干扰作用。结果表明,瞬时表达的siRNA能够特异性干扰TMV侵染。含有重组表达载体pBI121／siRNA的根癌农杆菌渗入普通烟植株,在TMV接种后14 d其上部叶片没有表现典型的花叶症状。对这些叶片进行Northern杂交试验也没有检测到TMV病毒的RNA积累或仅有很少量的积累。在枯斑寄主心叶烟上,siRNA的瞬时表达可使TMV侵染后的枯斑数明显减少,甚至不产生枯斑。此外,同源于TMV外壳蛋白的siRNA瞬时表达对非同源的黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)没有抑制作用,表明siRNA的干扰作用具有高度的同源依赖性。