暴马桑黄MVD基因cDNA全长克隆及表达特性分析

编号 zgly0001712010

文献类型 期刊论文

文献题名 暴马桑黄MVD基因cDNA全长克隆及表达特性分析

作者 刘增才  孙婷婷  王世新  马依莎  王旭彤  孙健  邹莉 

作者单位 东北林业大学林学院  哈尔滨学院食品工程学院 

母体文献 南京林业大学学报(自然科学版 

年卷期 2020年04期

年份 2020 

分类号 S567.3 

关键词 暴马桑黄  甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶  基因克隆  生物信息学分析  表达特性分析 

文摘内容 【目的】对暴马桑黄中参与三萜合成途径的关键酶——甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶(MVD)基因进行克隆及表达特性分析,以了解暴马桑黄三萜合成的调控机制。【方法】利用生物信息学软件对MVD基因cDNA序列进行分析,并采取同源重组方法构建原核表达载体。用qRT-PCR技术分析MVD基因在暴马桑黄不同发育阶段表达特性;以分光光度计法测定暴马桑黄在不同发育阶段的三萜含量和变化规律。【结果】暴马桑黄MVD基因cDNA序列全长1 209 bp,编码402个氨基酸,相对分子质量为43.43 ku,命名为SbMVD(登录号为MK977617)。系统进化树表明:暴马桑黄MVD蛋白和紫芝、灰树花MVD蛋白同源性最高。SDS-PAGE结果显示:在65 ku(包含21 ku标签蛋白)附近出现与预期大小一致的目的蛋白条带。qRT-PCR分析及三萜含量测定结果表明:暴马桑黄SbMVD基因转录水平和三萜含量在不同发育阶段呈先升后降的变化趋势,并且两者变化趋势基本一致。【结论】通过对SbMVD基因的克隆及表达特性分析,推测该基因在三萜合成途径中发挥一定作用,为进一步研究该基因在暴马桑黄三萜合成过程中的功能奠定了基础。