棉铃虫类肌钙蛋白基因的克隆、原核表达纯化及其时空表达谱分析

编号 zgly0001639087

文献类型 期刊论文

文献题名 棉铃虫类肌钙蛋白基因的克隆、原核表达纯化及其时空表达谱分析

作者 艾新宇  赵洁  王亚美  魏原杰  刘小宁 

作者单位 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2018年03期

年份 2018 

分类号 S433.4 

关键词 类肌钙蛋白基因  克隆与表达  生物信息学分析  时空表达  棉铃虫 

文摘内容 为探索棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)类肌钙蛋白基因HaCal的生理功能及其所编码蛋白的生物特性,采用PCR方法克隆了HaCal的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,借助在线软件对其进行生物信息学分析,通过原核表达技术诱导表达和纯化其编码的蛋白,并通过实时荧光定量PCR技术分析其在棉铃虫不同发育龄期和组织中的表达量。结果显示,HaCal的ORF序列长度为564 bp,编码187个氨基酸,理论分子量为20.52 kD,理论等电点为7.64。其保守结构域与Calponin家族一致,但不含跨膜区和信号肽,系亲水性蛋白。原核表达结果显示,融合蛋白大小与理论值一致,纯化获得了纯度较高的目的蛋白。HaCal在棉铃虫幼虫不同发育阶段和不同组织中均有表达,在6龄幼虫体内表达量最高,是1龄幼虫的2.34倍;在5龄幼虫中肠中表达量最高,是头部的257.14倍。表明棉铃虫类肌钙蛋白基因HaCal可能与棉铃虫的生长发育过程密切相关。