枸杞中IPP异构酶相关基因(IPI)的分离

编号 zgly0000446746

文献类型 期刊论文

文献题名 枸杞中IPP异构酶相关基因(IPI)的分离

作者 张爱香  季静  王罡  抗艳红 

作者单位 河北北方学院农学系  天津大学农业与生物工程学院 

母体文献 西北农业学报 

年卷期 2006,15(3)

页码 186-189

年份 2006 

分类号 Q784 

关键词 枸杞  叶片  cDNA文库  IPI  基因  分离 

文摘内容 以宁夏枸杞叶片为材料, 采用异硫氰酸胍-酚-氯仿法提取完整的总RNA, 利用PolyATract mRNA Isolation System(Promega公司)分离mRNA, 然后利用Universal Riboclone R^cDNA Synthesis System(Promega公司)合成双链cDNA, 在cDNA末端连接上EcoR Ⅰ接头, 并与λExCell载体连接, 利用Packagene Lambda DNA Packaging System进行包装, 构建出滴度为2.78×10^5pfu/mL, 重组效率为88.1%的枸杞叶片cDNA文库。用Digoxigenin(DIG)标记龙胆草IPI探针, 并对枸杞叶片cDNA文库进行筛选, 获得7个IPIcDNA阳性克隆。释放质粒后, 进行酶切鉴定, IPI阳性克隆cDNA插入片段的大小为1.5kh左右。