齿兰环斑病毒运动蛋白基因的原核表达及多克隆抗体制备

编号 zgly0001445750

文献类型 期刊论文

文献题名 齿兰环斑病毒运动蛋白基因的原核表达及多克隆抗体制备

作者 詹瑞基  李欲轲  李明健  洪鲲  乙引  万晴姣 

作者单位 贵州师范大学生命科学学院 

母体文献 植物检疫 

年卷期 2013年06期

年份 2013 

分类号 S436.8 

关键词 齿兰环斑病毒  运动蛋白  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 采用RT-PCR技术从感染齿兰环斑病毒贵州分离物(ORSV-GZ)的苋色藜叶片中扩增出该病毒的运动蛋白(MP)基因。测序结果表明:该MP基因全长912 bp,编码303个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a(+)-MP,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在25℃以1.0 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白基因。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为54 kDa,与预测相符合。以该重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备的抗体效价达1:25600。该多抗与ORSV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他5种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。本实验为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。