吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007吲哚-3-乙酰胺IAA合成功能及其依赖途径鉴定

编号 zgly0001685128

文献类型 期刊论文

文献题名 吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007吲哚-3-乙酰胺IAA合成功能及其依赖途径鉴定

作者 刘婉慧  陈飞飞  叶建仁  王朝恩  康熠  付欢欢 

作者单位 南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院 

母体文献 林业科学 

年卷期 2019年09期

年份 2019 

分类号 Q78 

关键词 吡咯伯克霍尔德氏菌  吲哚-3-乙酸  吲哚-3-乙酰胺途径  色氨酸2-单加氧酶基因  吲哚乙酰胺水解酶基因 

文摘内容 【目的】探索吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007（Burkholderia pyrrocinia JK-SH007）合成生长素吲哚-3-乙酸（indole-3-acetic acid, IAA）的能力,并阐明B.pyrrocinia JK-SH007存在色氨酸依赖型的吲哚-3-乙酰胺（indole-3-acetamide, IAM）IAA合成途径。【方法】使用Salkowski比色法和酶联免疫吸附法（ELISA）进行L-色氨酸对B.pyrrocinia JK-SH007合成IAA能力影响的检测;以B.pyrrocinia JK-SH007全基因组为模板,设计特异性引物克隆iaaM和iaaH基因,并使用生物信息学方法对其蛋白质和亲缘关系进行分析;通过实时荧光定量PCR方法分析B.pyrrocinia JK-SH007中的iaaM和iaaH基因在L-色氨酸处理下的差异表达。【结果】B.pyrrocinia JK-SH007菌株能够合成15.663μg·mL-1的IAA,在以L-色氨酸为前体的条件下其合成IAA的量显著增加,达到了44.404μg·mL-1。iaaM和iaaH基因均含有一个完整的开放阅读框,其中iaaM基因全长1 782 bp,编码593个氨基酸,属于Aminooxidase super family家族;iaaH基因全长1 368 bp,编码455个氨基酸,属于Amidase super family家族。在L-色氨酸的处理下,B.pyrrocinia JK-SH007中的iaaM和iaaH基因的表达量均显著增加。【结论】B.pyrrocinia JK-SH007具有合成IAA的能力,L-色氨酸对其合成IAA具有显著促进作用,且克隆得到了iaaM和iaaH基因,其在进化上具有一定的保守性,证明B.pyrrocinia JK-SH007中存在吲哚-3-乙酰胺IAA合成途径。