吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007产嗜铁素的相关基因克隆及条件优化

编号 zgly0001674928

文献类型 期刊论文

文献题名 吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007产嗜铁素的相关基因克隆及条件优化

作者 陈艳彬  韩燕燕  王斐  叶建仁  任嘉红 

作者单位 长治学院生物科学与技术系  南京林业大学林学院 

母体文献 中国生物防治学报 

年卷期 2019年04期

年份 2019 

分类号 S476 

关键词 吡咯伯克霍尔德氏菌  嗜铁素  cepR基因 

文摘内容 为了明确吡咯伯克霍尔德氏菌Burkholderia Pyrrocinia JK-SH007是否产嗜铁素,揭示其生防机制,本文通过CAS检测该菌株产嗜铁素的能力,并对其嗜铁素合成相关基因cepR进行克隆及序列分析,同时采用单因素试验及响应面法对菌株JK-SH007产嗜铁素条件进行优化。结果表明,菌株JK-SH007具有明显的产嗜铁素能力,其嗜铁素合成相关基因cepR大小为720 bp,与B. pyrrocinia(EU034001)的亲缘关系最近,同源性为99%,两者序列相似性为97%,13个位点出现SNP;另外菌株JK-SH007cepR基因编码的氨基酸序列有3个氨基酸发生了替换,两者一致性为97%。该菌产嗜铁素最优培养时间是15 h、p H 8、转速200r/min、最佳碳源和氮源分别是甘油和氯化铵;PB试验筛选出影响该菌株产嗜铁素的关键性因素分别是p H、加碳量、加氮量;CCD试验结果显示,p H和加氮量的交互作用较明显;最终采用Design-Expert软件分析出菌株JK-SH007产嗜铁素最佳方案为碳源加入量15.00 g/L、氮源加入量10.50 g/L、温度30℃、pH7.36,优化后菌株产嗜铁素能力由18.59提升到37.86,响应面优化产嗜铁素条件的效果是显著的,嗜铁素产量得到明显提高。