HP-PRRSV HuN4株ORF7原核表达载体的构建及表达

编号 zgly0001488037

文献类型 期刊论文

文献题名 HP-PRRSV HuN4株ORF7原核表达载体的构建及表达

作者 刘洪斌  孙心  李静  李琳 

作者单位 哈药集团生物疫苗有限公司 

母体文献 中国动物保健 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S852.65 

关键词 HP-PRRSV  原核表达  N蛋白 

文摘内容 目的:构建HP-PRRSV Hu N4株ORF7原核表达载体,诱导表达重组N蛋白。方法:本实验选取HP-PRRSV经典株Hu N4株,根据ORF7序列(EF635006)及原核表达载体PGEX-6p-1中的多克隆位点设计引物,进行ORF7基因的克隆和原核表达载体的构建;将重组载体在原核表达体系中进行表达,通过SDS-PAGE电泳鉴定蛋白表达情况。结果:以HP-PRRSV Hu N4株c DNA为模板,PCR扩增出约为372 bp片段,经插入原核表达载体PGEX-6p-1,构建原核表达质粒PGEX-ORF7,鉴定后经1mmol/L IPTG在37℃下诱导,3 h后蛋白表达量最大;通过SDS-PAGE鉴定蛋白表达成功。结论:成功构建了HP-PRRS Hu N4株ORF7基因原核表达载体,以及进一步表达重组融合N蛋白;为进一步研究病毒的结构及功能奠定基础。