马蹄金ISSR反应体系的正交优化

编号 zgly0000467824

文献类型 期刊论文

文献题名 马蹄金ISSR反应体系的正交优化

作者 王昆蕾  干友民  马啸  曾兵  刘伟 

作者单位 四川农业大学草业科学系 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2006,4(6)

页码 866-870

年份 2006 

分类号 S661.1 

关键词 马蹄金  ISSR  反应体系  正交设计  优化 

文摘内容 以CTAB法提取的马蹄金叶片DNA为模板, 应用L16(4^5)正交表系统分析了DNA、Mg^2+、dNTP、Taq酶、引物5种ISSR反应成分浓度变化对扩增结果的影响。量化分析结果表明: Taq酶、dNTP不同水平对PCR反应结果有显著影响, 正交设计可以应用于ISSR-PCR反应体系的建立, 用这种方法建立的马蹄金ISSR优化反应体系为: 1×buffer, 25ng模板DNA, 1.75mmol/L Mg^2+, 225μmol/LdNTP, 0.91μmol/L引物, 1.25U7 Taq DNA聚合酶, 总体积20μl。这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术, 研究马蹄金的地理变异提供一个标准化程序。