鹰嘴豆ISSR反应体系的正交优化

编号 zgly0001487315

文献类型 期刊论文

文献题名 鹰嘴豆ISSR反应体系的正交优化

作者 靳晓丽  田新会  杜文华 

作者单位 甘肃农业大学草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/中-美草地畜牧业可持续研究中心 

母体文献 草地学报 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S529 

关键词 鹰嘴豆  ISSR  反应体系  正交设计  优化 

文摘内容 鹰嘴豆（Cicer arietinum）ISSR反应体系的建立可以为鹰嘴豆种质资源遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位提供理论依据和技术参考。本研究以CTAB法提取的鹰嘴豆DNA为模板,采用L16（45）正交设计直观分析法,对鹰嘴豆ISSR-PCR反应中的4个主要因素(Mg2+浓度,引物浓度,TaqDNA聚合酶浓度,dNTPs浓度)在4个水平上进行优化,并在最优ISSR-PCR反应体系的基础上对引物UBC826的最适退火温度进行筛选。结果表明:Mg2+和引物浓度对PCR扩增结果有显著影响,dNTPs和Taq酶的浓度变化对PCR扩增结果无显著影响。鹰嘴豆ISSR-PCR优化反应体系（25μL）为:3mmol·L-1 Mg2+,0.2mmol·L-1 dNTP,0.24μmol·L-1引物,2U Taq DNA聚合酶。UBC826最适退火温度为56℃。