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油松cDNA SRAP-PCR反应体系的建立与优化



编号 zgly0001528973

文献类型 期刊论文

文献题名 油松cDNA SRAP-PCR反应体系的建立与优化

作者 刘洋  高宝嘉  张斌  陈明叶 

作者单位 河北农业大学林学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年07期

年份 2016 

分类号 S791.254 

关键词 油松  正交设计  cDNA-SRAP  体系优化 

文摘内容 为了建立油松cDNA SRAP-PCR反应体系,利用正交设计L16(45)对PCR反应体系的Taq酶、模板cDNA、引物、Mg2+、d NTP这五个因素在四个水平上进行优化。使用SPSS软件对PCR结果结合方差分析和直观分析。结果表明:不同因素水平的变化对SRAP-PCR反应的影响大小依次为d NTP>模板c DNA>Taq酶>引物>Mg2+。筛选各因素最佳水平,油松c DNA SRAP-PCR最佳反应体系(20μL):Taq酶2 U,c DNA模板用量80120 ng,引物浓度0.4μmol/L,Mg2+浓度1.5 mmol/L,d NTP浓度0.2 mmol/L。这一优化体系的建立有助于今后利用cDNA-SRAP技术对油松进行基因表达差异的分析。

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