镰形扇头蜱丝氨酸蛋白酶SP30基因的克隆及原核表达

编号 zgly0001423443

文献类型 期刊论文

文献题名 镰形扇头蜱丝氨酸蛋白酶SP30基因的克隆及原核表达

作者 关洁  曹杰  张厚双  周勇志  周金林 

作者单位 上海师范大学生命与环境科学学院  中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2012年06期

年份 2012 

分类号 S852.7 

关键词 镰形扇头蜱  丝氨酸蛋白酶SP30基因  原核表达 

文摘内容 根据丝氨酸蛋白酶保守性氨基酸序列设计引物,以镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA为模板,经PCR扩增得到SP30基因的保守区,通过5’RACE(rapid amplification of cDNA Ends)和3’RACE技术得到全长基因。将该基因连入原核表达载体pGEX-4T-1,经IPTG诱导纯化得到重组蛋白。以镰形扇头蜱卵、幼蜱、若蜱、成蜱各发育阶段的cDNA为模板进行Real-timePCR实验。结果显示,SP30基因全长1194 bp,开放阅读框长900 bp,编码299个氨基酸,预计蛋白分子质量30 kDa。Real-time PCR分析结果表明,该基因在四个不同的发育阶段均有不同程度的表达。