金银花糖基转移酶基因LjUGT71E1的克隆及原核表达

编号 zgly0001577156

文献类型 期刊论文

文献题名 金银花糖基转移酶基因LjUGT71E1的克隆及原核表达

作者 徐道华  亓希武  陈吟  于盱  房海灵  梁呈元 

作者单位 江苏省中国科学院植物研究所  江苏省农业种质资源保护与利用平台 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年05期

年份 2018 

分类号 S567.79 

关键词 金银花  LjUGT71E1  基因克隆  表达分析  原核表达 

文摘内容 糖基化广泛存在于生物体中,具有非常重要的作用,而糖基转移酶则是催化糖基化反应的关键酶。本研究根据转录组数据库,设计引物从金银花(Lonicera japonica Thunb.)中克隆得到一个糖基转移酶编码基因LjUGT71E1,序列分析表明该基因的CDS为1 503 bp,理论可编码氨基酸数目为501,等电点(p I)预测为5.09,理论分子量为55 579.71 Da。多重序列比对表明LjUGT71E1与其它植物UGT71家族成员在序列上保守性很高,并且其C端具有催化植物次生代谢产物糖基化的糖基转移酶所具有的保守的PSPG-box基序。系统发生分析表明LjUGT71E1与人参(Panax ginseng)和甜叶菊(Stevia rebaudiana)的UGT71E亚家族成员聚为一支。荧光定量PCR分析表明,该基因在金银花的五个花期均有表达,在幼蕾时期相对表达量达到峰值。进一步构建了LjUGT71E1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白,为后续的功能研究提供了基础。