龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CLCCoAOMT)基因的克隆和表达分析

编号 zgly0000797065

文献类型 期刊论文

文献题名 龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CLCCoAOMT)基因的克隆和表达分析

学科分类 220.45;经济林学

作者 陈虎  何新华  罗聪  杨丽涛  张保青  宋修鹏 

作者单位 广西大学农学院  广西农业科学院广西作物遗传改良与生物技术重点开放实验室 

母体文献 中国农业科学 

年卷期 2012,45(1)

页码 118-126

年份 2012 

分类号 Q523 

关键词 龙眼  咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶  基因克隆  表达分析  原核表达 

文摘内容 【目的】克隆龙眼咖啡酰辅酶A—O-甲基转移酶(CLCCoAOMT)基因, 分析其序列特征和在低温胁迫下不同组织中的表达情况并进行原核表达研究。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从龙眼叶片中克隆DLCCoAOMT基因, 用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析, 利用荧光定量PCR研究DLCCoAOMT基因在不同组织中的表达。【结果】克隆得到DLCCoAOMT基因, GenBank登录号为JN093023。该cDNA全长993bp, 具有1个744bp的完整开放阅读框(ORF), 编码247个氨基酸。序列分析表明, DLCCoAOMT编码的氨基酸序列与其它植物的CCoAOMT蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示, 龙眼DLCCoAOMT与桦木属的CCoAOMT蛋白亲缘关系较近。利用荧光定量技术进行组织表达模式分析发现, DLCCoAOMT基因在根、茎、叶中均有表达。总体上表达量在根和茎中较多, 叶中较少, 随着低温胁迫时间延长, DLCCoAOMT基因在各组织的表达量也发生变化。原核表达结果表明, DLCCoAOMT基因在大肠杆菌中获得表达。【结论】从龙眼中克隆到咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因, 该基因可能参与调控低温胁迫。