国槐SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选

编号 zgly0000847282

文献类型 期刊论文

文献题名 国槐SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选

作者 孙荣喜  宗亦臣  郑勇奇 

作者单位 国家林木遗传育种重点试验室国家林业局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所  国家林业局植物新品种分子测试实验室 

母体文献 广西林业科学 

年卷期 2014(4)

页码 343-350

年份 2014 

关键词 国槐  SRAP-PCR  体系优化  引物筛选  毛细管电泳  正交设计 

文摘内容 为建立国槐(Sophora japonica)最佳SRAP-PCR反应体系,采用正交试验设计L16(45)对影响PCR体系的5个因素(模板浓度、引物浓度、Mg2+浓度、Taq聚合酶和d NTP用量)4个水平进行了优化,确定了国槐的最优SRAP-PCR反应体系:Taq聚合酶1.5 U,d NTPs 0.30 mmol/L,模板DNA 90 ng,Mg2+2.0 mmol/L,引物0.3μmol/L,dd H2O补至20μL。各因素对PCR反应的影响从大到小依次为:Taq聚合酶>d NTPs>模板DNA>Mg2+>引物。