湿地松、加勒比松SRAP反应体系的优化及引物筛选

编号 zgly0000737313

文献类型 期刊论文

文献题名 湿地松、加勒比松SRAP反应体系的优化及引物筛选

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 李义良  赵奋成  吴惠姗 

作者单位 广东省林业科学研究院 

母体文献 广东林业科技 

年卷期 2011,27(3)

页码 8-13

年份 2011 

分类号 S791.24 

关键词 湿地松  加勒比松  SRAP-PCR  体系优化  引物筛选 

文摘内容 采用正交设计L9(34)对影响湿地松、加勒比松SRAP反应体系的DNA浓度、dNTPs浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶浓度4个因素进行了优化试验,结果表明: 扩增反应体系5优于其他体系,即25μL体系中含有DNA 40 ng、dNTPs 1 mmol/L、引物10μmol/L、DNA聚合酶1.0 U。在此基础上,通过单因素试验确定了湿地松、加勒比松SRAP反应关键因子的最适浓度,即25μL反应体系中含有DNA 40 ng、dNTPs 1 mmol/L、引物5μM及Taq DNA聚合酶1.0 U。利用优化反应体系从216对引物组合中筛选出扩增条带清晰、稳定、多态性好的引物42对。优化的SRAP反应体系将为湿地松、加勒比松种质资源遗传多样性评价、分子标记辅助选择、遗传连锁图谱构建研究提供基础。