马铃薯SRAP-PCR反应体系优化及验证

编号 zgly0001644826

文献类型 期刊论文

文献题名 马铃薯SRAP-PCR反应体系优化及验证

作者 张旭  赵兴奎  耿淑娟  彭锁堂  段永红 

作者单位 山西农业大学农学院 

母体文献 植物遗传资源学报 

年卷期 2018年05期

年份 2018 

分类号 S532 

关键词 马铃薯  SRAP-PCR  体系优化  单因素试验  正交设计 

文摘内容 为建立马铃薯最佳的SRAP-PCR反应体系,以马铃薯基因组DNA为模板,采用单因素和正交试验相结合的方法,对影响SRAP-PCR反应体系的5个因素(引物浓度、Mg2+浓度、模板DNA用量、d NTPs浓度和Taq DNA聚合酶用量)进行优化,建立马铃薯优化的SRAP-PCR反应体系。结果表明:马铃薯SRAP-PCR最佳反应体系中模板DNA用量为60 ng,Mg2+浓度为1.5 mmol/L,d NTPs浓度为0.25 mmol/L,引物浓度为0.60μmol/L,Taq DNA聚合酶用量为0.75 U。各因素对扩增结果影响依次是:Mg2+浓度>Taq DNA聚合酶用量>模板DNA用量>引物浓度>d NTPs浓度。用6份马铃薯样品DNA对优化体系进行验证,扩增结果清晰稳定,可用于马铃薯遗传多样性分析和遗传图谱构建等研究。