甜樱桃DELLA蛋白基因PaGAI的克隆与表达分析

编号 zgly0001420097

文献类型 期刊论文

文献题名 甜樱桃DELLA蛋白基因PaGAI的克隆与表达分析

作者 钟翡  沈欣杰  刘芳  袁华招  刘兰英  李天红 

作者单位 中国农业大学农学与生物技术学院北京市果树逆境生理与分子生物学重点开放实验室  北京市海淀区植物组织培养技术实验室 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2012年01期

年份 2012 

分类号 S662.5 

关键词 甜樱桃  DELLA蛋白  基因克隆  原核表达 

文摘内容 利用RT-PCR和RACE技术从甜樱桃(Prunus avium L.)嫩叶中克隆了赤霉素信号转导途径中的关键负调控因子DELLA蛋白基因cDNA全序列,将其命名为PaGAI。该基因cDNA全长2310bp,开放阅读框ORF为1788bp,推测其编码一个含有595个氨基酸残基的多肽链,蛋白质分子量约64kD。生物信息学分析结果表明,PaGAI编码蛋白具有DELLA蛋白保守结构域,其N端存在两个非常保守的酸性结构域DELLA和VHYNP作为信号感知区域,C端有VHIID、RVER和SAW结构域作为阻遏区域。PaGAI与其它植物的DELLA蛋白具有较高的同源性,其中与苹果MdRGL2b蛋白同源性最高,达到84%。构建pGEX-4T-1/PaGAI原核表达体系,并转化E.coli BL21,经0.5mmol·L-1IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE检测获得了分子质量为91kD的融合蛋白,半定量RT-PCR分析表明,PaGAI在花、果实、叶片、韧皮部中普遍表达,在花与韧皮部中的表达远远强于在果实与叶片中的表达。