春兰ISSR-PCR反应体系的优化

编号 zgly0000462992

文献类型 期刊论文

文献题名 春兰ISSR-PCR反应体系的优化

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 高丽  杨波 

作者单位 中国科学院武汉植物园 

母体文献 华中农业大学学报 

年卷期 2006,25(3)

页码 305-309

年份 2006 

分类号 S682.310.353 

关键词 ISSR  春兰  反应体系  遗传多样性 

文摘内容 以春兰为材料, 对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模板DNA、dNTPs、MgCl2、primer、Taq DNA聚合酶的浓度及引物退火温度、反应循环数进行了探讨, 确立了适合春兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数: 在15μL反应体系中含1×buffer, O.2mmol/L dNTPs, 2.0mmol/LMgCl2, 0.2μmoll/L引物, 0.3UTaq DNA聚合酶, 20ng模板DNA。PCR扩增程序: 94℃预变性2.5min ; 94℃变性45S, 48-58℃退火(退火温度随引物不同而定)45s, 72℃延伸2min, 35个循环; 72℃延伸5min。