狭边大叶藓(Rhodobryum ontariense)ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001373051

文献类型 期刊论文

文献题名 狭边大叶藓(Rhodobryum ontariense)ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 汪琛颖  赵建成 

作者单位 河北师范大学生命科学学院  郑州师范高等专科学校生命科学系 

母体文献 武汉植物学研究 

年卷期 2009年06期

年份 2009 

分类号 R284.1 

关键词 狭边大叶藓  ISSR  反应体系  优化  遗传多样性 

文摘内容 研究目的是获得适用于狭边大叶藓(Rhodobryum ontariense)遗传多样性研究的ISSR-PCR反应标准化程序。通过单因素试验设计,对Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板、引物浓度,以及退火温度、循环次数等影响ISSR扩增的主要因素进行了研究和优化。结果表明,UBC808、UBC811、UBC812、UBC825、UBC826、UBC841、UBC888及UBC891引物适用于该研究;20μL ISSR-PCR最适反应体系包括:6 ng DNA模板、0.4μmol/L引物、2.25 mmol/L Mg2+、0.6 UTaqDNA聚合酶、0.4 mmol/L dNTPs。扩增程序为:94℃预变性4 m in;然后94℃变性1 m in,48~50℃(根据不同引物确定)复性2 m in,72℃延伸1 m in,共进行40个循环;最后,72℃延伸7 m in,4℃保存。