短柄袍ISSR—PCR反应体系的优化

编号 zgly0000403602

文献类型 期刊论文

文献题名 短柄袍ISSR—PCR反应体系的优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 丁丽亚  金则新  李钧敏 

作者单位 北京林业大学资源与环境学院  台州学院生态研究所 

母体文献 福建林业科技 

年卷期 2006,33(1)

页码 45-47,52

年份 2006 

分类号 Q943 

关键词 短柄袍  ISSR  反应体系  优化 

文摘内容 以短柄袍(Quercus glandulifera var.brevipetiolata)的DNA为材料.对影响PCR扩增效果的一些因素诸如模板DNA用量、Taq酶的用量、镁离子浓度、dNTP的浓度、引物用量和牛血清白蛋白浓度等指标进行筛选和优化。结果显示适合短柄袍ISSR。PCR分析最适宜的PCR反应条件为: 10μL PCR反应体积中, 1×Taq酶配套缓冲液(10mmol·L^-1 Tris—HCl, pH9.0, 50mmol·L^-1 KCl.0.1%Triton X-100), 0.75UTaq DNA聚合酶, 2mmol·L～MgCl2, 0.2mmol·L^-1 4×dNTP, 12pmol引物, 10ng模板DNA,2mg·mL^-1牛血清白蛋白。短柄袍ISSR扩增较适宜的退火温度为54.4℃。