青钱柳ISSR-PCR反应体系的优化

编号 zgly0000476310

文献类型 期刊论文

文献题名 青钱柳ISSR-PCR反应体系的优化

作者 谈探  金则新  李钧敏 

作者单位 北京林业大学自然保护区学院  台州学院生态研究所 

母体文献 安徽农业科学 

年卷期 2006,34(24)

页码 6450-6451

年份 2006 

分类号 Q94-336 

关键词 青钱柳  ISSR  反应体系  优化 

文摘内容 采用改进的SDS法提取青钱柳基因组DNA, 测试青钱柳ISSR扩增的最适退火温度, 并采用单因素试验, 测试了模板DNA、Mg^2+、dNTP、BSA、引物/Taq酶6个因素对青钱柳ISSR扩增的影响。结果表明: 合适的退火温度为56.3℃; 适宜的扩增体系为: 10μl PCR反应体积中, 1×Taq酶配套缓冲液浓度为(10mmol/L Tris·HCl, pH值9.0.浓度为50mmol/L KCl, 0.1%Triton X-100), 12ng模板DNA, 浓度为1.5mmol/L MgCl2, 浓度为1.0mmol/L 4×d NTP, 1mg/ml BSA, 15pmol引物, 0.75U Taq酶。