梅花‘南京红须’F3’H全长基于gDNA的TAIL-PCR法克隆

编号 zgly0000383616

文献类型 期刊论文

文献题名 梅花‘南京红须’F3’H全长基于gDNA的TAIL-PCR法克隆

作者 赵昶灵  郭维明  杨清  陈俊愉 

作者单位 南京农业大学生命科学学院  云南农业大学农学与生物技术学院  南京农业大学园艺学院  北京林业大学园林学院 

母体文献 西北植物学报 

年卷期 2005,25(12)

页码 2378-2385

年份 2005 

分类号 Q785 

关键词 梅花  ‘南京红须’  类黄酬3’羟化酶基因  全长  基因组DNA  TAIL-PCR  克隆 

文摘内容 根据从基因组DNA扩增到的梅花‘南京红须’类黄酮3’-羟化酶基因片段(469bp)设计3条嵌套的特异性引物.与6条短的随机简并引物组成的引物库分别用热不对称交错PCR法从‘南京红须’基因组DNA扩增该片段的5’和3’旁侧序列。获得的5’和3’旁侧序列分别长1443bp和1200bp。将两个旁侧序列在469bp片段的基础上拼接得到‘南京红须’全长为2lrl4bp的类黄酮3’-羟化酶基因, 被命名为pmhxF3’H。序列分析表明: 该基因与11条正式发表的、已递交到GenBank的类黄酮3’-羟化酶基因的eDNA序列在总体上有52.21%的一致性.具有3个内含子。其启动子含有1个“AGGA盒”、1个“GC盒”和3个“TATA盒”。这是首次用热不对称交错PCR法从木本植物的基因组DNA克隆到类黄酮3’-羟化酶基因。本研究将为梅花花色的分子生物学机理探索、花色的基因工程改良提供参考。