家蚕脂蛋白基因BmLp-c21的表达分析及蛋白质亚细胞定位

编号 zgly0001422212

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕脂蛋白基因BmLp-c21的表达分析及蛋白质亚细胞定位

作者 陈琴  杨丹  聂作明  陈健  张耀洲 

作者单位 浙江理工大学生物化学研究所  浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S881.2 

关键词 家蚕  脂蛋白基因BmLp-c21  序列特征  表达特征  多克隆抗体  实时荧光定量PCR  免疫印迹分析  亚细胞定位 

文摘内容 家蚕30 kD脂蛋白家族在家蚕的生长发育过程中具有重要的生理功能。从家蚕蛹cDNA文库中克隆到一条编码30kD蛋白质的基因cDNA序列,该序列全长2 803 bp,ORF为792 bp,编码含263个氨基酸残基的脂蛋白(low molecular 30K lipo-protein pBmHPC-21;GenBank登录号:Q00801),命名为BmLp-c21。将BmLp-c21克隆至原核表达载体pET-28a(+),转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达后通过亲和层析得到纯化的融合蛋白,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。亚细胞定位显示BmLp-c21主要存在于细胞质中,呈点状或者片状分布。通过实时荧光定量PCR和Western blotting方法,分别检测到家蚕不同发育时期和5龄幼虫不同组织中BmLp-c21 mRNA的转录水平与蛋白质的表达水平存在较大差异,在蛹期及5龄幼虫血淋巴中的mRNA转录水平和蛋白质表达水平最高。初步推测BmLp-c21在家蚕蛹的变态发育过程以及蚕体脂质的运输方面具有重要的功能。