ARF基因导入烟草的遗传转化研究

编号 zgly0001330710

文献类型 期刊论文

文献题名 ARF基因导入烟草的遗传转化研究

作者 徐刚标  卢孟柱  陆燕 

作者单位 中南林业科技大学  中国林业科学研究院林业研究所  中南林业科技大学 湖南长沙410004  北京100091  湖南长沙410004 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2007年05期

年份 2007 

分类号 Q943.2 

关键词 生物技术  ARF基因  烟草  根癌农杆菌  遗传转化 

文摘内容 以烟草无菌苗叶片为外植体,利用叶盘法,将含生长素应答基因(auxin response factor,ARF)的根癌农杆菌LBA4404携带双元质粒载体(pBin438)介导进行遗传转化.结果表明:诱导烟草叶片不定芽的最佳分化培养基为MS+0.8 mg.L-16-BA+0.05mg.L-1NAA,生根培养基为1/2MS+0.02 mg.L-1IBA+0.02 mg.L-1NAA,分化率、生根率分别为96.9%、96.7%;将预培养3 d的外植体与农杆菌菌液浸染3~5 min后,共培养2~3 d,然后转化到含Km75 mg.L-1的选择培养基上进行分化筛选,再转入Km为75 mg.L-1、100 mg.L-1的培养基上进行生根筛选,生根率为66.1%;与对照相比,转基因烟草在形态上发生了明显的改变,叶片颜色变深绿,叶片增厚,主叶脉变粗壮等.PCR扩增,获得40株阳性转基因苗,证明ARF基因已导入烟草中.