农杆菌介导的菜心遗传转化体系的建立

编号 zgly0000480703

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导的菜心遗传转化体系的建立

作者 张国裕  王岩  程智慧  王晓武 

作者单位 西北农林科技大学园艺学院  中国农业科学院蔬菜花卉研究所 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2006,34(9)

页码 60-64

年份 2006 

分类号 S634.035 

关键词 菜心  根癌农杆菌  遗传转化  子叶  转基因植株 

文摘内容 以建立的菜心高频再生体系为基础, 利用GUS染色组织分析法研究了根癌农杆菌菌株、乙酰丁香酮(AS)、预培养时间、浸染时间和共培养时间等因素对菜心((Brassica campestris L.var, parachinesis)子叶遗传转化的影响, 探讨了适宜菜心转化的卡那霉素与抑菌抗生素使用浓度。结果表明, 农杆菌菌株AGL0对菜心的浸染能力最强, 添加100μmol/L的乙酰丁香酮有利于菜心转化; 子叶外植体预培养2d后浸染(菌液浓度OD600值为0.8)15min, 共培养2d, 然后转移到含15mg/L卡那霉素和100mg/L Ticarcillin的筛选培养基上, 进行转化植株的再生, 植株再生率及外植体GUS阳性率均较高, 是较优的转化条件; 本试验共获得8株转化植株, 转化率达2.44%, 经PCR分析和Southern杂交检测表明, GUS基因已整合进入菜心基因组。