编号
zgly0000795579
文献类型
期刊论文
文献题名
刺五加GAPDH基因的克隆及序列分析
学科分类
220.45;经济林学
作者单位
河北联合大学生命科学学院
母体文献
中草药
年卷期
2012,43(1)
页码
155-158
年份
2012
分类号
R282.12
关键词
刺五加
GAPDH基因
克隆
序列分析
内参照基因
文摘内容
目的对刺五加Eleutherococcus senticosus GAPDH基因进行克隆及序列分析,使其成为可用的内参照基因。方法采用改良的异硫氰酸胍法提取刺五加总RNA,运用RT-PCR法克隆GAPDH基因的部分序列,并以其为内参照基因进行半定量PCR。结果克隆了长度为627 bp的刺五加GAPDH基因,推测其编码209个氨基酸,与三七、人参、拟南芥的GAPDH氨基酸序列同源性分别为97%、93%、93%,核苷酸同源性分别为94%、86%、84%。其作为内参照基因的半定量PCR具有良好的扩增效果和重现性。结论首次分离并克隆了刺五加GAPDH cDNA,证实该序列可以作为基因表达分析的内参照基因,为刺五加苷生物合成中关键酶的表达分析及调控机制研究奠定基础。