湿加松MSAP反应体系建立及引物筛选

编号 zgly0000931604

文献类型 期刊论文

文献题名 湿加松MSAP反应体系建立及引物筛选

作者 李义良  赵奋成  李宪政  陈铭甄  钟岁英  邓乐平  李福明  张应中 

作者单位 广东省森林病虫害生物防治重点实验室  广东省林业科学研究院  广东药学院生命科学与生物制药学院  广东省台山红岭种子园 

母体文献 广东林业科技 

年卷期 2015(3)

页码 35-39

年份 2015 

关键词 湿加松  MSAP  DNA甲基化  引物筛选 

文摘内容 为开展湿加松(Pinus elliottii×P.caribaea)甲基化研究,以湿加松幼嫩针叶为材料,建立了湿加松MSAP(甲基化敏感扩增多态性)反应体系,其中:酶切-连接体系为:400 ng基因组DNA用Eco RⅠ+HapⅡ或Eco RⅠ+MspⅠ各3 U进行双酶切,37℃保温24 h,用T4 DNA ligase 16℃连接过夜。最佳预扩增体系为:酶切-连接产物1μL、上下游引物各1μL、2×PCR mastermix 10μL和dd H2O2 7μL。