鲤鱼春季病毒血症病毒磷蛋白基因的克隆与原核表达

编号 zgly0001435812

文献类型 期刊论文

文献题名 鲤鱼春季病毒血症病毒磷蛋白基因的克隆与原核表达

作者 李月红  付云红  Julia Pridgeon  宋琳  张东鸣 

作者单位 吉林农业大学动物科技学院  美国农业部水产动物健康研究实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2012年07期

年份 2012 

分类号 S941.41 

关键词 鲤春病毒血症病毒  P蛋白  原核表达 

文摘内容 【目的】克隆鲤鱼春季病毒血症病毒(SVCV)的磷蛋白(P蛋白)基因,并对其进行原核表达,为进一步制备SVCV P蛋白单克隆抗体及建立新的SVCV诊断方法奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增SVCV P蛋白基因,将其克隆入pET-28a(+)载体中,获得原核重组表达质粒pET28-P,进行原核表达。将该重组原核表达质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用0.4mmol/L IPTG进行诱导表达,用镍亲和层析试剂盒对表达产物进行纯化,分别用SDS-PAGE和Western Blotting方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了SVCV P蛋白基因,该基因长度为933bp。成功构建了原核重组表达质粒pET28-P,其诱导表达产物分子质量约为37ku;表达的重组P蛋白可被SVCV阳性血清所识别。【结论】成功克隆了SVCV P蛋白基因,获得了分子质量约为37ku的重组P蛋白。