狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒系统的表达及鉴定

编号 zgly0001423451

文献类型 期刊论文

文献题名 狂犬病病毒磷蛋白在杆状病毒系统的表达及鉴定

作者 许运斌  徐洁萍  张金阳  昝洁  阮系真  周继勇 

作者单位 浙江大学农业部动物病毒学重点实验室  浙江大学传染病诊治国家重点实验室 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2012年02期

年份 2012 

分类号 S852.659.5 

关键词 狂犬病病毒  P蛋白  杆状病毒表达系统 

文摘内容 为了建立狂犬病毒磷蛋白(phosphoprotein,P)的体外表达系统,本研究将RT-PCR扩增的狂犬病病毒ERA株P蛋白基因克隆于杆状病毒转移载体pFastBacHTA,构建重组质粒pFastBacHTA-P,并转染昆虫细胞Sf9包装形成重组杆状病毒。SDS-PAGE分析显示重组质粒pFastBacHTA-P转染的Sf9细胞中出现了分子量约为42 kDa的蛋白条带,Western blot证实分子量约为42 kDa的蛋白能与抗His的单克隆抗体发生特异性反应,间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)分析进一步显示Sf9细胞表达的P蛋白与抗P蛋白单克隆抗体能特异性结合。这些实验证明,狂犬病病毒P蛋白不仅在Sf9细胞中获得表达,而且具有良好的免疫反应性。狂犬病病毒P蛋白杆状病毒表达体系的建立,为蛋白结构的解析和诊断试剂的研制奠定了基础。