小反刍兽疫病毒Tibet 07株P蛋白的真核表达及鉴定

编号 zgly0001469612

文献类型 期刊论文

文献题名 小反刍兽疫病毒Tibet 07株P蛋白的真核表达及鉴定

作者 王清华  赵文年  刘春菊  王淑娟  包静月  王志亮 

作者单位 中国动物卫生与流行病学中心  新疆农业大学动物医学学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年08期

年份 2014 

分类号 S852.659.6  Q786 

关键词 小反刍兽疫  P蛋白  杆状病毒表达系统 

文摘内容 为应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的磷蛋白并对其进行鉴定,应用PCR技术扩增小反刍兽疫病毒Tibet 07株P基因片段,克隆至pFastBac/CT-TOPO载体中,构建重组穿梭质粒pFastBac-PPRV-P,进一步构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-P,转染sf 9细胞,获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE鉴定P蛋白的表达,利用Western blot和间接免疫荧光鉴定P蛋白的抗原性。结果表明,表达的P蛋白分子质量约54ku;感染的sf 9细胞可与小反刍兽疫阳性血清发生特异性反应。表明应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了小反刍兽疫病毒西藏分离株Tibet 07的P蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。