山羊原始生殖细胞分离与培养的影响因素

编号 zgly0001383251

文献类型 期刊论文

文献题名 山羊原始生殖细胞分离与培养的影响因素

作者 熊浩  崔雯  王杏龙  刘翔 

作者单位 扬州大学动物科学与技术学院 

母体文献 中国草食动物 

年卷期 2010年05期

年份 2010 

分类号 S827 

关键词 白山羊  胚胎干细胞  原始生殖细胞  分离培养 

文摘内容 以本地白山羊胎儿的生殖嵴为试验材料,从原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)中分离培养得到胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EGCs),对其进行体外培养和鉴定等。胎儿生殖嵴在室温(25℃)下消化15 min,使用0.125%胰酶+0.02%EDTA比0.25%胰酶+0.04%EDTA效果好,差异显著(P<0.05);挑取集落法和胰酶消化法均能将PGCs传至第2代,两种方法差异不显著(P>0.05);以GEF为饲养层,在培养液中添加不同浓度和种类的细胞因子:①LIF:10 ng/mL;②LIF:20 ng/mL;③LIF(10 ng/mL)+SCF(10 ng/mL);④LIF(20 ng/mL)+SCF(20 ng/mL)。4种情况对于原代集落形成率的影响差异不显著(P>0.05),均能得到传至第2代的EGCs;研究不同胎龄胎儿分离培养PGCs的效果,结果发现4例冠臀长小于15 mm的胎儿仅观察到一个原代集落,6例大于30 mm的胎儿没有观察到原代集落。