人类原始生殖细胞的体外培养

编号 zgly0000480562

文献类型 期刊论文

文献题名 人类原始生殖细胞的体外培养

作者 于海生  华进联  王洪锋  杨炜峰  刘胜  蒋会婷  窦忠英 

作者单位 西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2006,34(2)

页码 1-6,11

年份 2006 

分类号 Q813.11 

关键词 原始生殖细胞  胚胎干细胞  白血病抑制因子  条件培养液  人 

文摘内容 为了探讨人原始生殖细胞(primordial germ cells.PGCs)的体外分离培养条件及相关影响因素, 以小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEF)作为饲养层, 室温下用1.25g/L胰蛋白酶+0.2g/L EDTA消化人胚胎组织5～9min, 或用1g/L胶原酶(Ⅳ型)消化20～40min, 分离得到PGCs, 然后用不唰培养液培养, 从培养液角度较为系统的研究原代培养人原始生殖细胞的条件。结果表明。在KSR培养液(体积分数15%Knockout serum replacement+高糖DMEM+10ng/ml。人重组白血病抑制网子(LIF)+4ng/mL人重组碱性成纤维细胞生长因子+10ng/mL Forskolin)和STO(建系的小鼠胚胎成纤维细胞)条件培养液中培养的原代人原始生殖细胞, 有较高的克隆形成率; 培养液中添加不同质量浓度的LIF对克隆形成率影响差异不大。