小鼠胚胎成纤维细胞饲养层、Matrigel及贴附因子包被培养板培养小鼠胚胎干细胞的对比研究

编号 zgly0001720860

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠胚胎成纤维细胞饲养层、Matrigel及贴附因子包被培养板培养小鼠胚胎干细胞的对比研究

作者 赵芳  陈坤琳  邢光东  钱勇  曹少先  李隐侠  孟春花  张建丽  张俊  桂红兵  仲跻峰  王慧利 

作者单位 江苏省农业科学院畜牧研究所 

母体文献 黑龙江动物繁殖 

年卷期 2020年05期

年份 2020 

分类号 Q813.11 

关键词 小鼠  胚胎干细胞  细胞外基质  克隆集落  多能性因子 

文摘内容 为进一步优化细胞外基质,建立胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)稳定的体外培养体系,试验分别采用小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)饲养层、基质胶(Matrigel)和贴附因子(attachment factor,AF)细胞培养板,以N2B27为基础培养基,评估和比较不同处理对小鼠ESCs(mESCs)自我更新及多能性维持的影响。结果表明:在KSR浓度为5%的N2B27培养基中,MEFs饲养层的mESCs形态立体,边缘清晰,呈规则的圆顶状; Matrigel、AF细胞培养板培养的mESCs形态立体,呈集落样生长。MEFs饲养层培养的mESCs传代后黏附快,集落形成显著快于Matrigel、AF细胞培养板,AF细胞培养板培养的mESCs黏附少,集落形成慢。免疫荧光染色结果显示,3种处理的mESCs均表达Oct4和Sox2蛋白,但AF细胞培养板培养的mESCs中Oct4、Sox2和Nanog的转录表达水平低于Matrigel细胞培养板,其中Sox2和Nanog差异显著或极显著(P <0.05或P <0.01)。说明AF可用于mESCs培养,但在细胞黏附、增殖速率及多能因子表达上与MEFs、Matrigel有差异。